(1)外伤：外伤可产生巨大软组织肿块，特别是肢体、面部和躯干软组织肿块。通常这种情况有外伤史，并且相关的血肿。有触痛和表面皮肤变色，而肉瘤通常无触痛，并且皮肤或皮下组织无异常颜色。
(2)无痛性肿块：特别是无明显外伤史的肿块生长，应高度警惕而考虑做活组织检查，特别是经过1周以上反复观察证实肿块确有扩大，更应考虑做活检。体腔或器官内肿物产生梗阻和渗出物症状时，也应考虑活检。
(3)膀胱炎：极少情况下在影像学和膀胱镜检查中，膀胱炎可产生酷似膀胱的横纹肌肉瘤表现。然而，经过1~2周的对症治疗，膀胱炎患者的影像学改变往往恢复正常，在这种情况下，可避免进行活检。
(4)某些良性肿瘤：例如脂肪瘤、横纹肌瘤或神经纤维瘤也可见到某些类似的临床表现。在不影响功能的情况下，可完全切除肿瘤。
(5)很少情况下，骨化性肌炎、化脓性肌炎、炎症性肌纤维组织细胞增生，在初期可能引起某些症状的混淆。
(6)其他种类的恶性肿瘤：如果一个儿童或年轻人长有肿块并停止快速的生长，即使受侵袭的区域有触痛和患者有发热，也应考虑活检，因为某种恶性肿瘤可能导致类似的症状，某些儿童恶性肿瘤酷似横纹肌肉瘤，如非霍奇金淋巴瘤、神经母细胞瘤和尤文肉瘤，在光镜水平和肉瘤相似，为了区别这些实体肿瘤，需要进行特殊染色、电镜超微结构检查、单克隆抗体测定、尿标本儿茶酚胺排泄的检测等。偶尔，白血病的绿色瘤或组织细胞增生症能引起身体一部分出现肿物，这时应做活检以建立正确诊断。
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